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ELISA操作真的很简单吗?

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这个问题,我来回答你,说实在的,我做了三年的ELISA实验,这实验,说容易很容易,但说难,还真不简单,这就要看你究竟在什么前提下去做了!

一切问题,还是用辩证的观点来看待吧!

ELISA,全名为酶联免疫吸附试验,由英文名称enzyme linked immunosorbent assay翻译而来。

Elisa的主要基本原理是——首先,使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持它的免疫活性。

接下来,使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。

然后,在测定时,把待检测的物质和酶标抗原或抗体按照一定的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。

在这些步骤中,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量将会与标本中受检物质的量成一定的比例。

通过加入一种酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与待检测的物质的量直接相关,所以可根据颜色反应的深浅进行定性或定量的分析待测物质,在定性方面,也就是说是阴性还是阳性;在定量方面,可以计算出它的数值。

总的来说,只要理解了这个原理,对于全面知晓ELISA是做什么的就容易的多了。

如果您购买了相应的试剂盒,那么,相对而言,只要有一台比较先进的酶标仪,完全按照试剂盒里的说明书来做,还真是不难,只要有点化学和生物基础的人都能做的来。

但是,如果一切都需要自己去制备的话,那么整个流程不是繁琐,而是复杂,就拿抗体来说,制备抗体,可能会涉及到饲养小动物,特别是白鼠,对它注射抗原,用抗原来激发白鼠体内产生抗体,将白鼠解剖后取出相应的抗体,再通过杂交瘤细胞进行单克隆抗体的复制,最终得到的血清可以说是抗体的半成品,但这个抗体是否有效,还有待于实验来决定。其实这些步骤也相当于是发明一个试剂盒一般都会经过的步骤。

如果您想将ELISA做好,那还真要费一番功夫了!

再普及一下,ELISA方法多有以下几种类型:双抗体夹心法、双位点一步法、间接法测抗体、竞争法、捕获法测IgM抗体、应用亲和素和生物素的ELISA,但万变不离其中,只要您对原理十分清楚,用哪种方法就看您的实验需要了。

如果在这方面您还有其他疑惑都可以来问我,希望以上的回答对您有帮助!

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